IHC uuringud - mis see on, tulemuste laiendamine

"Onkoloogiat" on peaaegu võimatu täpselt diagnoosida ilma spetsiaalsete uuringute läbiviimiseta. Praegu on meditsiinil sellised võimalused. Seetõttu tehakse vähktõve kahtluse korral immunohistokeemiline uuring. Mõelge, mis see analüüs on, millistel juhtudel on see ette nähtud ja mis võimaldab teil tuvastada.

Uurimistöö olemus

See uuring tähendab koeproovi uurimist mikroskoobi all. Need saadakse biopsia abil ja eelnevalt töödeldakse spetsiifiliste antikehadega..

Onkoloogilised haigused on pikka aega olnud arstide ja teadlaste vaateväljas. Paljude uuringute käigus leiti, et pahaloomulised rakud toodavad oma elutegevuse käigus spetsiifilisi valke, mida nimetatakse antigeenideks. Need seonduvad antikehadega, just sellel põhineb immunohistokeemiline uuring, kui uurimiseks võetud patsiendi kude uuritakse pärast töötlemist hoolikalt mikroskoopia abil.

Kui antikehad suhtlevad vähirakkudega, võib täheldada fluorestsentsi nähtust. See annab alust olla peaaegu 100% kindel, et onkoloogia toimub..

Peaaegu kõigi neoplasmide vastased antikehad on juba välja töötatud ja meditsiinipraktikas aktiivselt kasutusele võetud..

Uurimisvõimalused

Vähi immunohistokeemiline uuring võimaldab:

• Tuvastage neoplasm ja määrake selle tüüp.
• Siit saate teada esmase fookuse levimus kehas.
• Bioloogilist materjali sekundaarsetest fookustest võttes on võimalik kindlaks teha metastaaside leviku allikas.
• Uuring võimaldab teil hinnata ravi efektiivsust.
• Analüüsi abil saate teada, mis arengujärgus on vähk.
• Immunohistokeemiline uuring võimaldab teil teada saada ka neoplasmide kasvukiirust.

Seda uurimismeetodit peetakse tavapärase histoloogilisega võrreldes informatiivsemaks. Mõlemat uurimismeetodit kasutades saate täieliku pildi, seetõttu teevad arstid seda praktikas kõige sagedamini..

Näidustused uuringuks

Selle meetodi abil saab uurida praktiliselt kõiki inimkeha kudesid, kuid enamasti on selline analüüs ette nähtud onkoloogia kahtlusega.

1. Primaarsete neoplasmide tuvastamiseks.
2. Metastaaside tuvastamiseks.
3. See analüüs aitab määrata patoloogia arengu prognoosi ja kulgu..
4. Analüüs on üks meetoditest paljude hormoonide retseptorite uurimiseks..
5. IHC uuring võimaldab tuvastada mikroorganisme.
6. Uurimismeetodit kasutatakse vähirakkude tundlikkuse määramiseks kemoteraapia ja kiiritusravi suhtes..

Analüüsimeetod

Immunohistokeemilisi uuringuid viiakse läbi mitmel etapil, millest esimene on bioloogilise materjali kogumine. See saadakse biopsia või materjali eemaldamise teel operatsiooni ajal..

Tükk koe asetatakse formaliini ja saadetakse laborisse, kus seda muudetakse:

1. Materjal rasvatustatakse spetsiaalsete ühenditega ja täidetakse parafiiniga. Selles olekus saab seda säilitada peaaegu igavesti, nii et vajadusel saab uuringut korrata.
2. Järgmisel etapil saadakse kõige õhemad lõigud - tehakse mikrotoomia. Need asetatakse spetsiaalsetele prillidele.
3. Valmistatud sektsioone töödeldakse teatud kontsentratsiooniga antikehade lahustega. Töötlemiseks võib kasutada erinevaid koguseid antikehi sisaldavaid kompositsioone. Milline neist vähirakkudega suhtleb, sõltub kasvaja tüübist.

Rinnavähi immunohistokeemiline uuring

Selline analüüs on lihtsalt asendamatu, kui on kahtlus vähirakkude esinemisest rinnas. Östrogeeni ja progesterooni retseptorite arv on hädavajalik. Nende suurenemisel aktiveeritakse pahaloomuliste rakkude kasvuprotsess..

IHC uuringud võimaldavad mitte ainult vähki ära tunda, vaid ka määrata selle staadiumi. Uuringute abil saavad arstid teada, kas hormoonravi on näidustatud..

Suure hormoonide kontsentratsiooniga kasvajaid ravitakse kõige sagedamini üsna tõhusalt antihormonaalsete ravimitega..

Analüüsi käigus määratakse tingimata Ki-67 näitaja, see aitab määrata protsessi pahaloomulisust. Kui piimanäärme immunohistokeemiline uuring näitab Ki-67 kuni 15%, siis peetakse haiguse tulemust soodsaks. Kui see näitaja jõuab 30% -ni, on keemiaravi hädavajalik, sest kasvaja kasvab üsna kiiresti. 90% -line märk näitab kõige sagedamini surmava tulemuse paratamatust.

See analüüs ei ole ette nähtud mitte ainult rinnavähi kahtluse korral, vaid osutub ka üsna informatiivseks, kui:

• Tekib viljatus.
• Avastatud emaka pahaloomulised koosseisud.
• Reproduktiivses süsteemis on patoloogilisi muutusi.

Endomeetriumi immunohistokeemiline uurimine

Selline analüüs viiakse läbi juhul, kui:

• Raseduse katkemine on tavaline.
• Naisel oli mitu ebaõnnestunud IVF-i katset.
• Diagnoositud endometriidi krooniline vorm.

See uuring aitab välja selgitada, kas leidub rasestumist loomulikult.

Endomeetriumi koe IHC-uuring on ette nähtud naistele, kellel on juba mitu ebaõnnestunud kunstliku viljastamise katset.

Endomeetriumi koe kogumine toimub tsükli erinevatel päevadel, mille määrab arst.

Analüüsi tulemuste tõlgendamine

Tuleb meeles pidada, et ettevalmistatud koeproovide uurimise õigus on ainult arstil, kellel on tunnistus, mis kinnitab IHC meetodil analüüside läbiviimise erikoolitust..

Järeldus peaks näitama:

1. Antikehade näitajad, mille suhtes määratakse uuritud koe tropism.
2. Näidatud on vähirakkude tüüp ja nende arv.
3. Märgistatud on tuvastatud antigeenid, mis aitavad kindlaks teha onkoloogia tüüpi.

Uuringu tulemuste põhjal ei saa lõplikku diagnoosi panna. Onkoloogil on õigus seda teha alles pärast kõigi diagnostiliste protseduuride tõlgenduse saamist..

Seega võime järeldada, et immunohistokeemilised uuringud on efektiivsed rinnavähi või muude näärmete ja muud tüüpi onkoloogias. Analüüs annab põhjalikku teavet ja võimaldab teil ära tunda algavat patoloogilist protsessi rakutasandil.

Immunohistokeemilised testid

Immunohistokeemiline uuring

Immunohistokeemiline uuring (IHC) on kasvajahaiguste tänapäevase morfoloogilise diagnoosi alus, mis määrab diagnoosi õigsuse, edasise prognoosi ja mõnel juhul näidustuste moodustamise sihipärase ravi määramiseks.

IHC uuringu peamine eesmärk on kindlaks teha kasvaja diferentseerumine ja histogenees (koe kuuluvus).

Immunohistokeemiline uuring (IHC) on täiendav diagnostiline meetod, mida kasutatakse lisaks peamisele histoloogilisele värvimisele hematoksüliini ja eosiiniga, mis võimaldab tuvastada ja eristada healoomulisi ja pahaloomulisi kasvajaid. Sageli nõuab lõplik diagnoos lisaks konkreetsele morfoloogilisele pildile tuumori immunofenotüübi või bioloogiliste omaduste selgitamist, millel on oluline roll haiguse prognoosimisel ja näidustuste määramisel suunatud ravimite manustamiseks. Tänaseks on tänapäevane teadus suutnud tõestada, et just kasvaja bioloogiliste omaduste määramine ja geneetiliste determinantide (kasvaja geneetilised omadused) tuvastamine on onkoloogia eduka ravi võti..

Hiljuti on IHC analüüs muutunud laialdaselt kasutatavaks patoloogide igapäevases diagnostilises praktikas ja see pole enam olnud puhtalt teaduslike uuringute meetod..

IHC uuringu põhieesmärk on kindlaks teha kasvaja diferentseerumine ja histogenees (koe kuuluvus).

Mis on histogenees ja kasvaja diferentseerumine?

1. Kasvaja histogenees on selle koe päritolu. Selle fakti selgitamisel on suur diagnostiline väärtus ja see võimaldab teil valida mõistliku ravi. Tõepoolest, selle tundlikkus keemilise või kiiritusravi suhtes sõltub kasvaja päritolust..

2. Diferentseerumise aste näitab, kui palju kasvajarakk struktuuri ja funktsiooni poolest erineb normaalsest.

Sõltuvalt diferentseerumise astmest on kasvaja substraadi rakud:

• diferentseerunud, kui kasvaja struktuur on võimalikult lähedane eelkäija koe struktuurile;
• halvasti diferentseeritud, mille sarnasus algkoega kustutatakse;
• diferentseerimata (anaplaasia) - rakud, mis on kaotanud sarnasuse tavalisega (originaal).

Milleks see on mõeldud?

1. Kasvajate histoloogiline diagnoosimine;
2. Kasvaja nosoloogilise variandi määramine;
3. Võime määrata primaarne kasvaja metastaaside abil;
4. Kasvajahaiguse prognoosi määramine;
5. Suunatud ravi võimaluste ja näidustuste määramine jne..

Immunohistokeemiliste uuringute võimalused kaasaegses praktilises onkoloogias on järgmised:

Millal ja kuidas tehakse IHC uuringuid?

See test on ette nähtud kasvajahaiguse esinemise kahtluse korral. Uurimismaterjal võetakse operatsiooni ajal või biopsia abil spetsiaalsete tangide ja nõelte abil. Kudest tehakse õhuke mikrolõige, mida seejärel töödeldakse spetsiifiliste antikehade (immunohistokeemiliste preparaatide) lahusega, mis reageerivad kasvajavalkudega (antigeenid). Reageerinud piirkonnad kiirgavad erineva intensiivsusega sära, mille põhjal teeb arst järeldused.Näiteks võimaldab selliste markerite nagu CD15 ja CD30 ekspressioon kasvajarakkude poolt diagnoosida Hodgkini lümfoomi; CD117 - seedetrakti strooma kasvajad; CD20 - B-rakulised lümfoomid; CD3 - T-rakulised lümfoomid; HMB45, MelanА - melanoom jne..

Antikehad

Primaarsete kasvajate ja nende metastaaside IHC analüüsimiseks kasutatakse laias valikus markereid - antikehi (marker - normaalsete bioloogiliste protsesside, patogeensete protsesside või farmakoloogilise reaktsiooni indikaator terapeutilisele sekkumisele, mida saab objektiivselt mõõta ja hinnata). Antikehad on tsütospetsiifilised, koespetsiifilised, need võivad peegeldada rakkude proliferatsiooni protsesse ja kasvajaga seotud antigeene ning lõpuks võivad nad olla ise kasvaja markerid, näiteks onkofetaalsed antigeenid, ensüümid, rakuliste onkogeenide valguproduktid jne..

Meie laboril on terviklik antikehade komplekt, mis on heaks kiidetud kasutamiseks diagnostiliste testidena mitmesuguste elundite ja süsteemide kasvajate ning mittekasvajate kahjustuste korral..

Kasutatavate antikehade kogus sõltub konkreetsest juhtumist ja eeldatavast diagnoosist. "Laiendatud antikehade paneel" on antigeenide komplekt kasvaja erinevate struktuuride jaoks. Samuti on olemas "väike paneel", mis näitab kõige tavalisemaid kasvajaid. Antikehade paneeli saab valida kahel viisil: järk-järgult, suurendades nende spektrit järk-järgult, või võite kohe kasutada laia reagentide paneeli. Ühest küljest reaktiivide ja fondide märkimisväärne kokkuhoid kõrgemate tööjõukulude ja pika tööajaga, teiselt poolt suur antikehade tarbimine, millest mõned aitavad lõpliku diagnoosi võimalikult lühikese aja jooksul kindlaks teha.

Meie labori spetsialistid peavad kinni asjaolust, et IHC analüüs, olles lisameetod, peaks hõlmama nii kasvaja teatud immunofenotüüpi iseloomustavate markerite ekspressiooni positiivseid kui ka negatiivseid tulemusi, mis võimaldab välistada muid hüpoteese ja vähendada diagnostiliste vigade mahtu miinimumini..

Valitud haigused ja nende diagnoosimiseks kasutatud antikehad

Rinnakasvajad

Rinnavähk on naistel kõige levinum vähk ja vähktõvega seotud surma kõige sagedasem teine ​​põhjus. Varajane diagnoosimine, õigeaegne ja õige ravi võib oluliselt suurendada taastumisvõimalusi. Traditsiooniline immunohistokeemia (IHC) tehnika võib töötada väga väikeste koeproovidega. See asjaolu koos kasvajarakkude antigeenidele spetsiifiliste antikehade kasutamisega muudab selle meetodi tõhusaks vahendiks patomorfoloogi käes, kes diagnoosib ja ennustab onkoloogiliste haiguste kulgu..

Peamised diagnostilised markerid:

• Östrogeeni retseptor
• Progesterooni retseptor
• HER-2 / uus
• Ki-67
• p120 Kateniin
• CadherinE
• Rinnakasvajate diagnoosimise "kuldstandard" - hormonaalne profiil PR, ER, HER-2 / neu, Ki-67 - on kõigi vähkkoe aktiivsuse eest vastutavate retseptorite diagnoos. Sisaldab mitme näitaja uurimist.
• PR, ER on spetsiifilised retseptorvalgud, mis reageerivad östrogeeni ja progesterooni tootmisele. Enamik rinnavähkidest (umbes 80 protsenti) reageerivad aktiivselt hormoonide taseme muutustele. Nende retseptorite reaktiivsuse määramisel on hormoonravi potentsiaali hindamisel kriitiline roll..
• HER-2 / neu on vähkoes paiknev geenivalgu struktuur. See on retseptor, mis reageerib spetsiifiliste antikehade tootmisele. Soovitav on uurida seda parameetrit vähiravi prognoosi määramise seisukohast. Suure HER-2 / neu aktiivsusega on kasvajat raske ravida; esiteks on selle struktuuri aktiivsuse pärssimiseks vaja monoklonaalset ravi.
• Ki-67 on valgu struktuur, millel on võime aktiveeruda kasvaja aktiivse kasvu ajal. Selle näitaja uurimine võimaldab hinnata patsiendi elu prognoose. Mida kõrgemad on Ki-67 väljendusomadused, seda vähem on kasvaja diferentseerumist, seda vähem on haigel naisel võimalusi taastumiseks..

Eesnäärme kasvajad

Eesnäärmevähk on üks levinumaid vähke maailmas. Enamik juhtumeid (50–70%) diagnoositakse 3-4 etapis, sealhulgas 25% - kasvajaprotsessi üldistusega. Kahjuks on vähi varajane diagnoosimine iseloomulike sümptomite sagedase puudumise tõttu keeruline. Koos kliiniliste meetoditega on kõige informatiivsem eesnäärme biopsiate histoloogilise uurimise meetod.

Peamised diagnostilised markerid:

• p63;
• PSAP (eesnäärme happefosfataas);
• PSA (eesnäärmespetsiifiline antigeen);
• P504s (= AMACR - alfa metüülatsüül-CoA-ratsemaas);
• Kõrge molekulmassiga tsütokeratiin (34betaE12);
• ERG (ETSiga ​​seotud geen);
• PSMA (eesnäärmespetsiifiline membraani antigeen);
• Androgeeni retseptor;
• Bcl-X;
• Tsütokeratiin 5 ja 6;
• Tsütokeratiin Pan;
• Keratiin 8;
• Tsütokeratiin 8 ja 18;
• Ki-67;
• p53;
• Sünaptofüsiin;
• Basaalrakkude kokteil - tsütokeratiin HMW + p63.

Kopsukasvajad

Kopsuvähk on üks levinumaid surma põhjuseid. Aastas sureb maailmas selle haiguse tõttu umbes miljon inimest. Meestel on kopsuvähk 85–90% juhtudest seotud tubakasuitsetamisega. Kopsuvähi prognoos on endiselt halb. Ravi puudumisel sureb diagnoosimise hetkest kuni 90% patsientidest 2 aasta jooksul. Kirurgilise ravi korral on 5-aastane elulemus umbes 30%. Kirurgiline ravi koos kiiritus- ja ravimteraapiaga suurendab 5-aastast elulemust 40%. Metastaaside olemasolu halvendab prognoosi oluliselt. Kopsuvähiga patsientide tänapäevane diagnostika ja ravi ei saa ilma kasvaja morfoloogilise kontrollita koos kasvajarakkude histoloogilise struktuuri ja anaplaasia (diferentseerumise) astme spetsifikatsiooniga. Immunohistokeemiline meetod jääb diagnoosi selles etapis üheks kõige informatiivsemaks meetodiks.

Peamised diagnostilised markerid:

• Kilpnäärme transkriptsioonifaktor-1;
• Tsütokeratiin 7;
• MITTEVÄIKERAKuline kopsuvähk
  • ALK (DE5F3);
• KÜLMARAKU Kopsuvähk
  • Tsütokeratiin 14;
  • Tsütokeratiin 5/6;
  • CEA;
  • EGFR;
• KOPU VÄIKERAKULISED KARKINOOMID
  • KromograniinA;
  • Sünaptofüsiin;
• Kopsude adenokarcinoma
  • EMA;
  • TsütokeratiinPan.

Melanoom

Melanoom (ladina melanoom, antiik-kreeka keelest pärit melanoom malignum. Μέλας - “must”) (suu. Melanoblastoom) on pahaloomuline kasvaja, mis areneb melanotsüütidest - pigmentrakkudest, mis toodavad melaniini. Üks kolmest nahavähi tüübist ja neist kõige ohtlikum. See lokaliseerub peamiselt nahas, harvemini võrkkestas, limaskestades (suuõõnes, tupes, pärasooles). Üks inimese ohtlikumaid pahaloomulisi kasvajaid, sageli korduv ja metastaatiline lümfogeenne ja hematogeenne peaaegu kõigis elundites. Naha melanoomi ja selle metastaaside kontrollimine on onkomorfoloogi jaoks endiselt üks raskemaid ülesandeid. Pigmenteerimata melanoomide hulgas on nodulaarsed, pinnal levivad, näiteks lentigo, selge-, spindlirakulised, pleomorfsed, väikerakulised, müksoidsed, "nevoidsed", krikoidsed ja muud vormid.

Peamised diagnostilised markerid:

• Melanoomi assotsieerunud antigeen (MAA);
• CD63;
• Melanoomimarker (HMB45);
• MART-1 / Melan-A;
• Melanoom (gp100);
• Türosinaas;
• Mikroftalmia transkriptsioonifaktor (MiTF);
• Närvikasvu faktori retseptor (NGFR);
• S100;
• Melanoomipan (HMB45 + A103 + T311);
• MART-1 + türosinaas;
• Vimentin.

Standardpaneel sisaldab umbes viit immunohistokeemilist markerit:

• p53 - melanoomi mitoosi aktiivsuse aste;
• Ki-67 - leviku intensiivsuse hindamine, määrab haiguse prognoosi;
• bcl-2 - valk, mis hoiab ära naha melanoomi loodusliku apoptoosi, hinnatakse metastaaside tõenäosust;
• HMB-45 - melanotsüütide funktsiooni hindamine;
• S-100 on tüüpiline antigeen, mida leidub ainult melanoomis ja mida saab eristada teistest kasvajatest või healoomulistest kasvudest.

Lümfoproliferatiivsed häired

Lümfoom on lümfisüsteemi pahaloomuline kasvajahaigus. Lümfoomidest eristatakse lümfogranulomatoosi (Hodgkini lümfoom) ja kõik muud tüüpi lümfoomid on mitte-Hodgkini lümfoomid (NHL). Lümfoidrakkude tüübi järgi, millest kasvaja tekib, eraldatakse B-, T- ja (harva) NK-rakulised lümfoomid. Enamik lümfoomidest on B-rakulised. Lümfoproliferatiivsete haiguste diagnoosimine on praegu kaasaegse patoloogia esirinnas ja selleks on vaja üht kõige ulatuslikumat markerpaneeli. Igasuguste mitte-Hodgkini lümfoomide esinemissagedus on Euroopa riikides 12-15 juhtu 100 tuhande elaniku kohta aastas. Nende esinemise oht suureneb vanusega. Epsteini-Barri viirusega nakatumine on seotud suurenenud riskiga erinevat tüüpi lümfoomide, sealhulgas Burkitti lümfoomi tekkeks. Lastel on mitte-Hodgkini lümfoomid suhteliselt haruldased: mitte rohkem kui 5% kõigist NHL-i juhtudest kuuluvad lapsepõlve ja noorukiikka. Sellegipoolest hõivavad lümfoomid laste pahaloomuliste haiguste struktuuris sageduselt kolmanda koha - pärast leukeemiat ja kesknärvisüsteemi kasvajaid..

Peamised diagnostilised markerid:

Seedetrakti strooma kasvajad (SOGT)

Seedetrakt esineb peamiselt maos (60%) ja peensooles (25%), kuid esineb ka pärasooles (5%), söögitorus (5%) ja paljudes teistes kohtades (5%), sealhulgas pimesooles, sapipõies, mesenteria ja omentum. Haigestunud patsientide vanus varieerub noorukieast kuni 90-aastani, kuid enamik patsiente on vanemad, tipp on umbes 60 aastat vana. Enamikus uuringutes on meestel kerge eelsoodumus. 1998. aastal näidati, et TGCT ekspresseerib türosiini kinaasi retseptori KIT (CD117). Nende tuumorite põhjuseks olid interajalised rakud (Cajal). Nagu GST, ekspresseerivad Cajali rakud KIT-i ja enamik neist on CD34 suhtes positiivsed. Järgnevad uuringud paljude erinevate laboritega kinnitasid, et KIT on SOS-i kõige spetsiifilisem marker. Ligikaudu 90% juhtudest esineb seedetraktis raku pinnal ja / või kasvajarakkude tsütoplasmas immuunvastuvastatav KIT. Valdavas enamuses kasvajatest on KIT ekspressioon tugev ja ühtlane, kuid mõnel juhul demonstreeritakse ainult fokaalset positiivset reaktiivsust ja väikeses alagrupis KIT puudub (

5%) kasvajatest, mis vastavad seedetraktile teiste morfoloogiliste ja immunofenotüüpsete tunnuste järgi. KIT-positiivsete SALFA seas määratakse CD34 ekspressioon 60-70% juhtudest, samas kui 30-40% -l on positiivne reaktsioon silelihaseaktiinile (SMA) ja 5% - S-100 valgule. Ükski neist antigeenidest pole spetsiifiline seedetraktile. Desmiini ekspressioon tõelises KIT-positiivses SAT-s on äärmiselt haruldane (1-2% juhtudest) ja tavaliselt fokaalne. Seda onkoloogiliste haiguste vormi on morfoloogiliselt raske diagnoosida. Kaasaegsete markerpaneelide abil on võimalik selgelt ja mõistlikult diagnoosida kirjeldatud patoloogia erinevaid vorme. Immunohistokeemia on kohustuslik.

Peamised diagnostilised markerid:

• CD117 c-komplekt;
• CD34;
• Desmin;
• Beeta-kateniin;
• S100;
• GFAP;
• CD99;
• ActinSmothMuscle.

Pärasoolevähk

Kolorektaalvähk on USA-s meeste ja naiste seas kõige sagedamini diagnoositud vähk (välja arvatud nahavähk). Kolorektaalvähi esinemissagedus on viimase kahe aastakümne jooksul langenud (66,3 juhtumist 100 000 kohta 1985. aastal 45,5 haigusjuhuni 2006. aastal). Selle põhjuseks on kolorektaalsete skriiningtestide suurenenud kasutamine, mis võimaldab tuvastada ja eemaldada seedetrakti polüüpe enne nende vähiks arenemist. Vastupidiselt üldisele langusele on alla 50-aastaste noorte täiskasvanute hulgas, kellele mõõduka riski tõttu sõeluuringut ei soovitata, suurenenud käärsoole- ja pärasoolevähkide esinemissagedus meestel ja naistel alates 1994. aastast umbes 2% aastas. 2016. aastal oli USA kolorektaalse vähi suremus 49 500. Kolorektaalvähi suremus on viimase paarikümne aasta jooksul vähenenud nii meeste kui ka naiste rühmas, viimasel ajal on see järsem langus. See langus kajastab haigestumuse määra langust ning paranenud varajast diagnoosimist ja ravi. Käärsoole- ja pärasoolevähi varased staadiumid on tavaliselt asümptomaatilised, seetõttu on haiguse varajases staadiumis haiguse tuvastamiseks sageli vaja skriinimist. Haiguse progresseerumine võib põhjustada pärasoole verejooksu, vere ilmnemist väljaheites, roojamise muutust, kramplikku valu alakõhus. IHC kasutamist käärsoolevähi korral kaalutakse mitmel tasandil: kasvajate (endokriinsed või epiteeli tüüpi), päriliku eelsoodumuse ja prognoosi eesmärgil. IHC valdavaks kasutuseks on võimalike või kahtlustatavate metastaaside tuvastamine, kus käärsool on võimalik primaarne. Käärsoole metastaaside tüüpilised asukohad on maks ja kops, mõlemad elundid, mis võivad tekitada käärsoole metastaasidega identse vähi morfoloogia. IHC-d (FDA määruse I klass) kasutatakse pärast kasvaja esialgset diagnoosimist histopatoloogilise uuringu abil ja see ei kuulu kliinikute jaoks iseseisva uuringuna.

Peamised diagnostilised markerid:

• Beeta-kateniin;
• BRAF;
• CDX-2;
• COX-2;
• Tsütokeratiin 7;
• Tsütokeratiin 19;
• Tsütokeratiin 20;
• MLH1;
• MLH2;
• MLH6;
• MSLN;
• MUC1;
• MUC2.

Metastaatiline kartsinoom

Immunohistokeemia kõige tavalisem kasutamine maksakasvajate uurimisel on metastaaside allika määramine, kui kasvaja esmane lokaliseerimine pole teada. Immunovärvimispaneeli väljatöötamine ja rakendamine võib aidata lahendada peaaegu kõiki diagnostilisi probleeme. 2-6 tsütokeratiinid (CK) 7 ja CK 20 - esimene samm paljude kasvajate tuvastamisel ning täiendavate immuunvastustega, mis on suhteliselt spetsiifilised nais- ja meessuguelundite kasvajate suhtes, võimaldavad sageli tuvastada metastaatilise kasvaja esmast lokaliseerimist.

Peamised diagnostilised markerid:

• Erineva molekulmassiga tsütokeratiinid (CK 18, CK 19, CK 7 ja CK 20 jne).

Samuti on soovitatav lisada diagnostikapaneeli HER2 / neu ja Ki-67 ekspressioonile suunatud IHC testid..

• HER2 / neu on membraanvalk, mida kodeerib ERBB2 geen. Selle ekspressiooni suurendamine on oluline teatud pahaloomuliste protsesside patogeneesis ja progresseerumises. Selle retseptori testimine on mao, rinna, emaka ja selle lisandite vähi oluline bioloogiline marker;
• Ki-67 on tuuma antigeen, mis koosneb kahest polüpeptiidahelast ja on tuuma maatriksi põhiosa. Selle ekspressioon võimaldab isoleerida rakkude elutsükli aktiivses faasis olevaid proliferatiivseid kasvajarakke. See marker võimaldab teil määrata kasvaja kasvu fenotüübi ja kiiruse, metastaaside riski, võimaliku ravivastuse ja patoloogilise protsessi tulemuse.

Mao kasvajad.

Healoomuliste ja pahaloomuliste mao epiteelikasvajate hindamiseks ei nõuta immunohistokeemilisi uuringuid (IHC), kuna histopatoloogia annab tavaliselt diagnoosi, kuid metastaatilise maovähi uurimisel on IHC vajalik, kui kasvaja päritolu pole selge või kui makroskoopiline / Kasvaja röntgenikiirgus on segadust tekitav (näiteks maovähk tungib otse ja laialdaselt maksa ning seda ei saa histoloogiliselt eristada kolangiokartsinoomist). Lisaks võib IHC olla kasulik mao kartsinoomide, sealhulgas hepatoidse adenokartsinoomi, mitmete variantide kindlakstegemisel, mille korral maksa diferentseerumist saab kinnitada positiivse AFP vastusega. Mao adenokartsinoomid reageerivad paljude keratiinivastaste antikehadega, sealhulgas CK 18, CK 19, CK 7 ja CK 20. Kui CK 7 ja CK 20 kasutatakse koos, värvivad paljud mao adenokartsinoomid nii CK 7 kui ka CK 20. Ligikaudu 25% juhtudel on fenotüüp CK 7 + / CK 20- või CK 7- / CK 20+) ning vähesed juhtumid on mõlema markeri puhul negatiivsed. Esialgu arvati, et käärsoolevähi spetsiifiline marker CDX-2 on reaktiivne enam kui 50% juhtudest ja võib viidata väiksemale invasiivsusele. Mao adenokartsinoomil, nii soolestiku kui ka sigarakk-kartsinoomil, võib olla neuroendokriinne diferentseerumine ja see ei pruugi histoloogilisest pildist ilmneda, kuid avaldub kromograniini ja / või sünaptofüsiiniga värvimisel

EGFR-retseptori ekspressiooni määramine epiteelikasvajates

Keemiaraviskeemide piisava valiku jaoks viiakse läbi pärasoolevähi ja kopsukasvajate ning kaela- ja peakasvajate EGFR-retseptori ekspressiooni immunohistokeemiline (IHC) määramine..

EGFR (epidermise kasvufaktori retseptor) on üks transmembraansetest retseptoritest, seda ekspresseeritakse epiteelirakkude pinnal ning see on seotud rakkude kasvu ja diferentseerumise reguleerimisega. Rakkude jagunemine selle juuresolekul toimub palju kiiremini. Kui EGFR-retseptor aktiveeritakse pärast seondumist kasvufaktoritega (EGF ja TGF-a), käivitatakse kasvaja kasvu põhjustavad mehhanismid ja suureneb vähirakkude proliferatsioon ning stimuleeritakse ka metastaaside protsessi. EGFR-i ekspressioon on kasvaja kasvu stimuleerimise indikaator epidermise kasvufaktori retseptori aktiivsus. Kuna retseptori aktiveerimine toimub neoplasmi enda ainete tõttu, oleks õigem rääkida kasvaja EGFR-i ekspressioonist. EGFR-i ekspressiooni võib leida järgmistes vähivormides: kops, kael ja pea, käärsool ja pärasool. EGFR ekspressiooni immunohistokeemiline määramine võimaldab kindlaks teha nende retseptorite seisundit ja määrata ravi. EGFR ekspressioon on otseselt seotud pahaloomulisuse astme ja kasvaja arenguastmega. Spetsialist klassifitseerib vastavalt immunohistokeemilise uuringu saadud andmetele kasvaja EGFR-negatiivseks või EGFR-positiivseks.

EGFR üleekspressioon viitab suurele pahaloomulisusele, kasvaja hilisele arengule ja metastaatilistele protsessidele. See tegur on haiguse prognoosi suhtes ebasoodne ja näitab kasvaja suurt proliferatiivset aktiivsust, agressiivsust, resistentsust teraapia suhtes..

Madal EGFR-i ekspressioon näitab kasvaja taandarengut positiivse dünaamikaga ravis.

Östrogeeni ja progesterooni retseptorite tundlikkuse immunohistokeemiline uuring endomeetriumis

Östrogeeni ja progesterooni retseptorite tundlikkuse immunohistokeemiline uuring endomeetriumis viiakse läbi viljakuse puudumise põhjuste kindlakstegemiseks, samuti emaka kudedes esinevate protsesside pahaloomulisuse hindamiseks. Uuring on keeruline, see viiakse läbi plaanipäraselt, vajalik on patoloogi asjakohane kvalifikatsioon.

Östrogeeni (ER) ja progesterooni (PR) retseptorid on tundlikud markerid, mis reageerivad teatud hormoonide kõikumistele, mis mõjutavad kasvaja kasvu ja hüperplastiliste protsesside arengut endomeetriumis. Need paiknevad nii emaka epiteeli kudedes kui ka piimanäärme rakkudes. Nende kindlakstegemine võimaldab hinnata hormonaalsete tegurite mõju pahaloomulise kasvu progresseerumisele ning lisaks tuvastada lisaks emakale ka muude aktiivsuskeskkondade olemasolu. On kaasatud infiltratiivse vähi kahtlusega haigete naiste kohustuslikku sõeluuringuprogrammi.

Immunohistokeemiline uuring viiakse läbi:

• viljatus;
• endomeetriumi kasvajad;
• menstruatsiooni düsfunktsioon;
• hüperplastilised protsessid endomeetriumis.

Viljatuse korral võimaldab tehnika välja selgitada, kas munarakk saab emaka seina külge kinnituda. Vähi puhul pole see meetod varajane diagnoos. Retseptori aktiivsuse hindamine võimaldab tuvastada metastaaside esinemist ja hinnata ravi efektiivsust emakaõõnes. Ovulatsioonihäirete korral selgitab tehnika välja hormoonravi efektiivsuse. Hüperplastilise emakaõõne muutustega näitab östrogeeni ja progesterooni retseptorite aktiivsuse suurenemine halvasti diferentseerunud kasvajate arengut, mis võib olla naise eluohtlik.

Tulemuse üldpõhimõte on see, et mida suurem on retseptori aktiivsuse ekspressioon, seda suurem on kasvaja progresseerumise tõenäosus. Mida madalam on aktiivsus, seda väiksem on loodusliku väetamise võimalus.

Krooniline endometriit

Krooniline endometriit on emaka limaskesta kihi põletik, mida provotseerivad mitmesugused viirused või patogeensed mikroorganismid. Patoloogilises fookuses tekivad endomeetriumi morfoloogilised ja funktsionaalsed muutused. Krooniline endometriit on kliiniline ja morfoloogiline sündroom, kus nakkusetekitaja endomeetriumi kahjustuse tagajärjel tekivad mitmed sekundaarsed morfofunktsionaalsed muutused, häirides emaka limaskesta tsüklilist biotransformatsiooni, mis põhjustab menstruaaltsükli ja generatiivsete funktsioonide pidevat häirimist. kroonilise endometriidi esinemissagedus elanikkonnas on 2,6–51%. Pealegi on nende naiste seas viljatud 60,4% ning ebaõnnestunud katseid IVF-i ja embrüo siirdamist täheldati 37% -l. 2006. aastal võrdsustas Rahvusvaheline Günekoloogia ja Sünnitusabi Föderatsioon mõisted "arenemata rasedus" ja "krooniline endometriit".

Kroonilise endometriidi põhjused:

• vaagnaelundite, tupe ja emakakaela kanali infektsioonid;
• emakasisene seade;
• varased intiimsed kontaktid;
• vaagnaelundite kiiritusravi;
• kirurgiline sekkumine emakaõõnde;
• alkoholi kuritarvitamine ja suitsetamine.

Praktiseerivad spetsialistid nimetavad vaagnaelundites esinevaid põletikulisi protsesse autoimmuunseks patoloogiaks. Häirete olemuse kindlakstegemiseks ja endomeetriumi põletikku tekitava immuunsüsteemi patoloogilise ravivastusega patsientide tuvastamiseks on ette nähtud immunohistokeemiline uuring, mis viiakse läbi monoklonaalsete antikehade standardse paneeli abil: CD16, CD20, CD138, CD56, HLA-DR.

Endomeetriumi vastuvõtlikkuse immunohistokeemiline uuring (implantatsiooniaken)

Endomeetriumi vastuvõtlikkus on endomeetriumi struktuuriliste ja funktsionaalsete omaduste kompleks, mis määrab selle võime implanteerida. Alates eelmise sajandi 90-ndate aastate algusest hakkab "endomeetriumi vastuvõtlikkuse" mõiste omandama oma tänapäevase tähenduse endomeetriumi ja embrüo kompleksse integratsiooni ja mitmetasandilise "dialoogi" protsessina "implantatsiooniakna" kindlal perioodil. Inimeste "implanteerimisakna" kestus on 4 päevad: 6. kuni 8. – 10. päevani pärast LH sekretsiooni tippu või 20–24. päeva menstruaaltsüklis (28-päevase menstruaaltsükliga). Praegu on vastuvõtlikkuse kolm taset: geneetiline, proteoomiline ja histoloogiline. Kui endomeetriumis avatakse "implantatsiooniaken", suureneb 395 geeni (ApoE, PLA2) ekspressioon ja väheneb 186 geeni (ITF, erinevad proteaasid, rakuvälised maatriksivalgud jne) ekspressioon. Endomeetriumi vastuvõtlikkusega seotud proteoomsete markerite hulgas eristatakse erinevaid adhesioonimolekule, kasvufaktoreid, tsütokiine ja retseptoreid: IL-1 perekond, LIF ja LIF-R, αVβ3, TNF-α, IFN-γ. Neist kõige enam uuritakse leukeemiat -inhibeeriv faktor (LIF) on IL-6 perekonna liige. Selle maksimaalset ekspressiooni endomeetriumis täheldatakse tsükli 20. päeval.Retseptsiooni kolmas tase on histoloogiline. Endomeetriumi "implanteerimisaken" vastab menstruaaltsükli sekretsiooni faasi keskmisele astmele. Endomeetriumil võivad olla vastuvõtlikud omadused ainult siis, kui vastuvõtlikkuse molekulaarsed markerid tuvastatakse täpselt menstruaaltsükli sekretsiooni faasi keskmises etapis. pinopodia. Need on endomeetriumi pindmise epiteeli apikaalses osas olevad mikroskoopilised eendid, mis on moodustatud mikrovilli asukohas "implantatsiooniaknas" ja ulatuvad emakaõõnde. Eeldatakse, et peamised blastotsüütide kinnitumise retseptorid asuvad pinopoodia pinnal, kuhu on kontsentreeritud ka LIF. Steroidiretseptorite ekspresseerimise igasugune tasakaalustamatus võib põhjustada endomeetriumi morfofunktsionaalsete omaduste, selle vastuvõtlikkuse häireid. Seetõttu võimaldab sekretsiooni faasi keskmises etapis ER ja PR taseme määramine täiendada endomeetriumi morfoloogilist uurimist, hinnata selle vastuvõtlikkust. Tavaliselt jääb PR / ER suhe stroomas vahemikku 2 kuni 4. Sekretsioonifaasi keskmises staadiumis täheldatakse endomeetriumi ERα taseme füsioloogilist langust. See on kriitiline sündmus, mis vabastab teatud geenid ülekaalukast mõjust ja annab signaali emakasisene vastuvõtlikkuse tekkeks..

ER α üleekspressioon sekretsiooni faasi keskmisel etapil põhjustab implantatsiooni bioloogiliste markerite ekspressiooni halvenemist, kahjustab endomeetriumi vastuvõtlikkust.

Kompleksne õppeprogramm koosneb järgmisest antikehade paneelist: ER, PgR, CD56, CD138, LIF, samuti pinopoodide arvu lugemisest.

Testide hind

Endoskoopiline materjal

* (tööpäevade arv, välja arvatud materjali üleandmise päev)

Kuidas uurimistööd teha?

Uurimistöö materjal: kirurgiline ja biopsia materjal, samuti valmis parafiinplokid koos prillidega (kasvaja proov). Soovitav on esitada väljavõte haigusloost, CT, MRI ja eelmise histoloogilise aruande tulemused (juhul, kui kasvaja diagnoos ei ole esmane).

Materjali vastuvõtt: meditsiinikeskuse lahtiolekuaegadel.

Ettevalmistus uuringuteks: pole vajalik.